合理使用徠卡激光共聚焦顯微鏡

　　徠卡激光共聚焦顯微鏡是近代生物醫(yī)學(xué)圖象儀器的重要發(fā)展之一，它是在成象的基礎(chǔ)上加裝激光掃描裝置，使用紫外光或可見(jiàn)光激發(fā)熒光探針，利用計(jì)算機(jī)進(jìn)行圖象處理，從而得到細(xì)胞或組織內(nèi)部微細(xì)結(jié)構(gòu)的熒光圖象，以及在亞細(xì)胞水平上觀察生理信號(hào)及細(xì)胞形態(tài)的變化。主要用于組織切片、活細(xì)胞的熒光標(biāo)記、三維圖像重建分析研究；細(xì)胞生物物質(zhì)、離子的定性、定量、定時(shí)和定位分布檢測(cè)等，可以在同一張樣品上同時(shí)進(jìn)行多重?zé)晒鈽?biāo)記觀察。對(duì)活細(xì)胞或組織切片進(jìn)行連續(xù)掃描，可獲得精細(xì)的細(xì)胞骨架、染色體、細(xì)胞器和細(xì)胞膜系統(tǒng)的三維圖像。與普通熒光顯微鏡相比，具有更高對(duì)比度、解析度和高靈敏度。

　　在使用過(guò)程中如果使用和維護(hù)不當(dāng)，常會(huì)出現(xiàn)一些問(wèn)題，或者不能達(dá)到儀器的應(yīng)有的效果。所有這些情況，有的是由于使用不當(dāng)所致，有的是由于維護(hù)不善，長(zhǎng)年失修引起的。因此對(duì)徠卡激光共聚焦顯微鏡的合理使用和妥善維護(hù)是非常重要的：

　　1、在使用時(shí)，要根據(jù)使用要求選用適當(dāng)?shù)姆糯蟊稊?shù)。

　　2、將各倍率的物鏡濃順序裝在轉(zhuǎn)換器上，在物鏡安裝前一定要將物鏡的螺紋和接觸端面以及轉(zhuǎn)換器的螺孔和接觸面部力構(gòu)應(yīng)清潔處理，不允許有任何灰塵存在，否則，會(huì)造成安裝不對(duì)而影響光學(xué)系統(tǒng)和成象質(zhì)量。

　　3、按所要觀察的標(biāo)本切片放置在工作臺(tái)面上，并用壓片將標(biāo)本切片壓緊，如有移動(dòng)尺的顯微a，可用卡腳將標(biāo)本切片卡平穩(wěn)，不然當(dāng)移動(dòng)只作縱向或橫向移動(dòng)時(shí)，觀察的象團(tuán)不穩(wěn)定，當(dāng)然這也有可6曙由于移動(dòng)尺本身質(zhì)量不好所致。如有象質(zhì)不穩(wěn)定時(shí)，則可作適量的微調(diào)即能彌補(bǔ)這個(gè)缺點(diǎn)。如果發(fā)現(xiàn)微調(diào)值太大時(shí)，這說(shuō)明移動(dòng)尺作縱向或橫向移動(dòng)的軌跡線不平行于工作臺(tái)面，或可能是工作臺(tái)面的不平皮。在這種情況下，應(yīng)將顯微鏡送檢修單位進(jìn)行修理。

　　4、在觀察標(biāo)本切片時(shí)，必然要進(jìn)行調(diào)焦，首先是祖調(diào)，而后是微調(diào)。在根調(diào)時(shí)應(yīng)根據(jù)不同倍率物鏡的工作距離作粗購(gòu)的調(diào)節(jié)，接著用眼觀察目鏡作粗調(diào)，直至能看到標(biāo)本的輪廓后再進(jìn)行微調(diào)。

　　5、在觀察標(biāo)本切片時(shí)，需要有一定的照明，其照明的光源有自然光源和人工光源兩種，不管用那種光源，為使在觀察時(shí)能得到清晰的物象，共亮度要合

適。