將計(jì)算清晰度與寬場(chǎng)顯微鏡的速度、熒光信號(hào)靈敏度和易用性相結(jié)合,實(shí)時(shí)解碼三維生物學(xué)*。
為了幫助您回答重要的科學(xué)問(wèn)題,THUNDER技術(shù)消除了使用基于相機(jī)的熒光顯微鏡觀察厚樣品時(shí)產(chǎn)生的焦外模糊現(xiàn)象。THUNDER技術(shù)采用了我們?nèi)碌墓怆姅?shù)字技術(shù)--Computational Clearing。因此,可以對(duì)多種三維樣品(包括模式生物、組織切片和三維細(xì)胞培養(yǎng)物)進(jìn)行高速、高質(zhì)量成像。請(qǐng)看這些圖片,了解THUNDER技術(shù)是如何幫助研究人員揭示樣品深處zui精細(xì)的結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié)的。
當(dāng)您看到THUNDER技術(shù)實(shí)現(xiàn)的無(wú)霧圖像質(zhì)量后,請(qǐng)?jiān)L問(wèn)我們的產(chǎn)品頁(yè)面了解更多信息。了解THUNDER技術(shù)如何將Computational Clearing與寬場(chǎng)顯微鏡的速度、熒光信號(hào)靈敏度和易用性相結(jié)合,從而實(shí)時(shí)解碼三維生物學(xué)*。(*符合 ISO/IEC 2382:2015 標(biāo)準(zhǔn))
小鼠--THUNDER技術(shù)模式生物成像
在這只 E12-14 小鼠(wt 樣本)中,神經(jīng)絲被染成紅色,以評(píng)估神經(jīng)元的生長(zhǎng)情況。該小鼠未進(jìn)行清除。法國(guó) IGBMC 圖像中心 Yves Lutz 提供。
類(lèi)器官--THUNDER技術(shù)-模式生物成像
直徑約 150 µm 的類(lèi)器官,安裝在凹陷載玻片上。使用高分辨率物鏡(FluoCombi III)通過(guò)THUNDER技術(shù)模型生物成像。圖片由瑞士徠卡顯微系統(tǒng)公司的 Heinrich Bürgers 拍攝。
果蠅大腦
THUNDER技術(shù)- 3D活細(xì)胞成像
果蠅大腦視頻。瑞士伯爾尼細(xì)胞生物學(xué)研究所 Rohan Chippalkatti 提供。
蜜蜂腿 - THUNDER技術(shù)-模式生物成像
蜜蜂的腿。圖片由德國(guó)徠卡顯微系統(tǒng)公司的 André Quinkertz 博士拍攝。
浮游動(dòng)物 - THUNDER技術(shù)
副纖毛蟲(chóng)是一種單細(xì)胞纖毛微生物,常見(jiàn)于池塘等死水中。圖片由新加坡徠卡顯微系統(tǒng)公司的 Adam Cliffe 拍攝。
小鼠shen臟切片 - THUNDER技術(shù)-3D組織成像
小鼠shen臟切片,含 Alexa Fluor™ 488 WGA、Alexa Fluor™ 568 磷脂色素和 DAPI。樣品為美國(guó)馬薩諸塞州沃爾瑟姆市賽默飛世爾科技公司生產(chǎn)的 FluoCells™ 制備的 3 號(hào)載玻片。
小鼠shen臟切片 - THUNDER技術(shù)-3D組織成像
小鼠shen臟切片,含 Alexa Fluor™ 488 WGA、Alexa Fluor™ 568 磷脂色素和 DAPI。樣品為美國(guó)馬薩諸塞州沃爾瑟姆市賽默飛世爾科技公司生產(chǎn)的 FluoCells™ 制備的 3 號(hào)載玻片。
平滑肌 - THUNDER技術(shù)-模式生物成像
小鼠肺部 300 微米切片中血管周?chē)钠交 ?x 物鏡。
德國(guó)吉森大學(xué) Mario Boehm 博士提供
原代培養(yǎng),大鼠
THUNDER Imager 3D 細(xì)胞培養(yǎng)儀
大鼠原代細(xì)胞培養(yǎng)物;Cy5(品紅色):β-III微管蛋白;Rhod(紅色):NG2蛋白,GFP(綠色):Nestin蛋白;DAPI(藍(lán)色):細(xì)胞核。圖片由美國(guó)徠卡顯微系統(tǒng)公司的 Louise Bertrand 拍攝。
鼠shen臟切片 - THUNDER技術(shù)-3D組織成像
小鼠shen臟切片,含 Alexa Fluor™ 488 WGA、Alexa Fluor™ 568 磷脂色素和 DAPI。樣品為美國(guó)馬薩諸塞州沃爾瑟姆市賽默飛世爾科技公司生產(chǎn)的 FluoCells™ 制備的 3 號(hào)載玻片。
斑馬魚(yú)xin臟 - THUNDER技術(shù)組織成像
斑馬魚(yú)xin臟,DAPI(細(xì)胞核,藍(lán)色)、肌球蛋白(心肌細(xì)胞,紅色)和 GFP(原始xin臟層,綠色)。瑞士弗里堡大學(xué) Anna Jazwinska 提供。
斑馬魚(yú)胚胎 - THUNDER技術(shù)-模式生物成像
斑馬魚(yú)胚胎 6 dpf,HPCs 穩(wěn)定表達(dá) mCherry,VEC 穩(wěn)定表達(dá) GFP。
由中國(guó)閩南師范大學(xué)薛宇博士提供。
C2C12 細(xì)胞
THUNDER Imager 3D活細(xì)胞和3D細(xì)胞培養(yǎng)儀
C2C12 細(xì)胞生長(zhǎng)并遷移到 transwell 膜的兩側(cè),然后用層粘蛋白 B(品紅色)染色以顯示核結(jié)構(gòu),用 Hoechst(藍(lán)色)染色以顯示 DNA,用 γH2AX(黃色)染色以顯示 DNA 損傷。使用THUNDER技術(shù)3D活細(xì)胞和 63X/1.4 油浸物鏡對(duì)細(xì)胞進(jìn)行成像。上面的圖像是 17.47 微米厚 Z 疊的擴(kuò)展景深投影。左圖為原始外熒光數(shù)據(jù),右圖為經(jīng)過(guò) LVCC 處理的THUNDER圖像。
圖片由美國(guó)加州大學(xué)戴維斯分校生物科學(xué)院神經(jīng)生物學(xué)、生理學(xué)和行為系 Lucas Smith 博士提供。
病毒標(biāo)記神經(jīng)元 - THUNDER技術(shù)-模式生物成像
病毒標(biāo)記的神經(jīng)元(紅色)和星形膠質(zhì)細(xì)胞(綠色)在人誘導(dǎo)多能干細(xì)胞衍生的皮質(zhì)球體內(nèi)。THUNDER技術(shù)模式生物配有 3.4 倍變焦的 2x 0.15 NA 物鏡,用于生成這張 425 µm Z 堆棧(26 個(gè)位置),在此作為擴(kuò)展景深 (EDoF) 投影展示。
圖片由美國(guó)加利福尼亞州 Sergiu Pasca 博士實(shí)驗(yàn)室的 Fikri Birey 博士提供。
轉(zhuǎn)基因果蠅眼睛感光器
THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)
轉(zhuǎn)基因果蠅的眼部感光器,其橫紋肌上有 EGFP 標(biāo)記,受犀牛蛋白 1 啟動(dòng)子(ninaE-EGFP)控制。
美國(guó)加利福尼亞州南舊金山基因泰克公司 Navid Nouri 提供。
耳蝸細(xì)胞 - THUNDER技術(shù)-3D組織成像
孵化后第 7 天的雞耳蝸細(xì)胞。80 微米振鏡切片,肌球蛋白 7a - 感覺(jué)毛細(xì)胞,Sox2 - 支持細(xì)胞。
圖片由美國(guó)加利福尼亞州 Amanda Janesick 提供。
神經(jīng)肌肉接頭 - THUNDER技術(shù)-3D組織成像
通過(guò)免疫染色神經(jīng)絲蛋白和β-Bungarotoxin觀察神經(jīng)肌肉接頭。圖片由美國(guó)加利福尼亞州的 Andrea Yung 提供。
??⑷猓‥xaiptasia pallida)
THUNDER技術(shù)模式生物
海葵息肉(Exaiptasia pallida)在THUNDER技術(shù)模式生物下的 RFP 和 GFP 熒光通道。??奈钙ぜ?xì)胞中寄生著雙鞭毛藻,由于其葉綠素自發(fā)熒光,在 RFP 通道中可以看到這些雙鞭毛藻。??旧碓诳谇恢?chē)鸵恍┯|手周?chē)@示綠色熒光帶。
圖片由美國(guó)加利福尼亞州 Christian Renicke 提供。
小鼠肺 - THUNDER技術(shù)組織成像
小鼠肺部,用 FITC、Cy3、Alexa 633 染色,使用 20 倍物鏡和擴(kuò)展景深 (EDOF) 拍攝。
圖片由美國(guó)加利福尼亞州 Ross Metzger 提供。
顯示淀粉樣斑塊的海馬體
THUNDER Imager 3D 細(xì)胞培養(yǎng)儀
小鼠海馬的縱向腦切片,顯示淀粉樣蛋白斑塊(綠色,用 6E10 抗體染色,抗β淀粉樣蛋白標(biāo)記物;藍(lán)色,DAPI(綠色,用 6E10 抗體染色,抗-β淀粉樣蛋白的標(biāo)記物),周?chē)切∧z質(zhì)細(xì)胞/小噬細(xì)胞(紅色,用抗-Abi1 抗體染色;藍(lán)色,DAPI)。
左圖--原始數(shù)據(jù)與擴(kuò)展景深投影;
右圖--大體積Computational Clearing Z 疊加擴(kuò)展景深投影。
圖片由美國(guó)加利福尼亞州 Mehrdad Shamloo 教授提供。
神經(jīng)嵴(NC)胚胎細(xì)胞群
THUNDER Imager 3D 細(xì)胞培養(yǎng)儀
上圖是使用THUNDER技術(shù) 3D 細(xì)胞培養(yǎng)器,使用 1.3 NA 40x plan apo oil 物鏡拍攝的。上圖為原始寬場(chǎng)數(shù)據(jù)。下圖是應(yīng)用徠卡專有的小體積Computational Clearing (SVCC) 技術(shù)去除焦外模糊并更好地顯示樣本內(nèi)部潛在結(jié)構(gòu)后的結(jié)果。
圖片由美國(guó)加利福尼亞州帕薩迪納市加州理工學(xué)院布朗納實(shí)驗(yàn)室 Michael Piacentino 提供。
成年小鼠卵巢
THUNDER技術(shù) 3D 細(xì)胞培養(yǎng)儀
將成年小鼠卵巢固定并用抗-NOBOX 染色,然后用改良 3DISCO 清除。將卵巢放入一個(gè)自制的孔中,孔底鋪上蓋玻片,然后在THUNDER 3D細(xì)胞培養(yǎng)成像系統(tǒng)上用 10X/0.32 物鏡進(jìn)行成像。
視頻顯示了合并的 4 層馬賽克、586µm 厚的 Z 疊的三維投影,即原始外熒光圖像和 LVCC 后的THUNDER處理圖像。
視頻由美國(guó)加州大學(xué)舊金山分校 Diana Laird 和 Bikem Soygur 博士提供
C.elegans - THUNDER技術(shù)模式生物
該菌株MAH215(Chang等人,Elife,2017)是一種雙熒光mCherry::GFP::LGG-1蛋白,通過(guò)可視化自噬體(APs)以及自溶酶體(ALs)來(lái)監(jiān)測(cè)秀麗隱桿線蟲(chóng)的自噬通量。
綠色點(diǎn)狀物(GFP)是自噬體,而自噬體在酸性環(huán)境中會(huì)淬滅 GFP,只發(fā)出 mCherry 信號(hào)。
圖片由美國(guó)賓夕法尼亞州匹茲堡大學(xué) Aditi U. Gurkar 博士提供
shen臟切片 - THUNDER技術(shù) 3D 組織成像
shen臟,用 DAPI、WGA-FITC 和 Phalloidin-568 染色。z=20微米。圖片由德國(guó)巴特諾海姆馬克斯-普朗克心肺研究所 Kerstin Troidl 博士提供
視網(wǎng)膜切片 - THUNDER技術(shù) 3D 組織成像
視網(wǎng)膜切片,PECAM-488、AF-555 染色。z=30微米。圖片由德國(guó)巴特諾海姆馬克斯-普朗克心肺研究所 Kerstin Wilhelm 博士提供
xin臟切片 - THUNDER技術(shù) 3D 組織成像
xin臟切片 - THUNDER Imager 3D 組織。用 DAPI、αSMA-FITC 和 Vimentin-Cy3 染色的xin臟切片。z=40µm。圖片由德國(guó)巴特諾海姆馬克斯-普朗克心肺研究所 André Schneider 博士提供
ganzang切片 - THUNDER技術(shù)-3D 組織成像
用 DAPI、SERVA、CD31-594 染色的ganzhang切片。z=70µm。
圖片由德國(guó)巴特諾海姆馬克斯-普朗克心肺研究所 Remy Bonnavion 博士提供
腦切片 - THUNDER技術(shù)-3D 組織成像
用 DAPI、αGFAP-AF647 染色的腦切片。z=100µm。圖片由德國(guó)巴特諾海姆馬克斯-普朗克心肺研究所 Hong Xu 博士提供
小鼠視網(wǎng)膜 - THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)
固定小鼠視網(wǎng)膜并用以下試劑染色:抗 CD31 抗體(綠色):內(nèi)皮細(xì)胞,IsoB4(紅色):小膠質(zhì)細(xì)胞抗 GFAP 抗體(藍(lán)色):星形膠質(zhì)細(xì)胞
樣本由美國(guó)南舊金山基因泰克公司杰里米-伯頓(Jeremy Burton)博士和 Jiyeon Lee 博士提供。成像者:Olga Davydenko 博士(徠卡公司)
小鼠主動(dòng)脈 - THUNDER技術(shù)-3D組織成像
紅線--彈性層,綠色和紅色--血管細(xì)胞,藍(lán)色--DAPI,圖片由美國(guó)加利福尼亞州 Ying Wang 提供
紅線--彈性層,綠色和紅色--血管細(xì)胞,藍(lán)色--DAPI,用 LAS X 3D Viewer 顯示。圖片由美國(guó)加利福尼亞州 Ying Wang 提供
纖維 - THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)
纖維被熒光素標(biāo)記。目的是研究動(dòng)態(tài)和孔隙。55 幅圖像的 Z 疊(130 微米)。圖片由美國(guó)德克薩斯州休斯頓萊斯大學(xué)生物工程系 Mollie Smoak 提供
小鼠晶狀體切片
THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)
本幻燈片是小鼠成人晶狀體橫切面,顯示纖維晶狀體細(xì)胞組織(綠色,用抗β-catenin 抗體(BDB610153)染色,這是一種膜蛋白)和 Afadin(紅色,用抗Afadin(PA1-25076)染色,這是一種肌動(dòng)蛋白絲結(jié)合蛋白,藍(lán)色,Hoechst)。
圖片由美國(guó)俄亥俄州立大學(xué) Plagemen 實(shí)驗(yàn)室 Nathalie Houssin 博士提供
人肝祖細(xì)胞 (HPC)
THUNDER技術(shù)-3D組織成像
人肝祖細(xì)胞(HPC)在器官組織肝細(xì)胞中的擴(kuò)增和分化。使用 HC PL Fluotar 40x/0.60 物鏡拍攝的 Z 疊片總厚度為 85µm,共 123 個(gè) Z 步。DAPI(白色):細(xì)胞核。Alexa488™(綠色):上皮細(xì)胞粘附分子(EpCAM)。PerCP-Cy5.5(紅色):信號(hào)轉(zhuǎn)換器 CD24。PE(藍(lán)色):原蛋白-1(CD133)。
樣本由英國(guó)諾丁漢大學(xué) E131 Andy Bennett 實(shí)驗(yàn)室 Fatima Abukunna 博士提供。
小鼠肺 - THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)
為研究 I 型肺泡上皮細(xì)胞(AT1)生物學(xué)而染色的小鼠肺組織。黃色表示 AT1 細(xì)胞系痕跡(GFP),洋紅色表示前糖化終產(chǎn)物受體(RAGE),青色表示水腫素 5(AQP5),灰色表示細(xì)胞核(DAPI)。圖片由美國(guó)加利福尼亞州 Yana Kazadaeva 提供。
果蠅卵泡 - THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)
果蠅蓇葖果在THUNDER技術(shù) 3D 細(xì)胞培養(yǎng)上用 63X/1.4 油浸物鏡成像。上面的視頻是 27.5 微米厚的 Z 疊的三維最大投影。視頻顯示了原始外熒光數(shù)據(jù)和經(jīng)過(guò) LVCC 處理的THUNDER技術(shù)圖像。
圖片由美國(guó)加州大學(xué)伯克利分校 Mark Khoury 和 David Bilder 提供
鹽水蝦腿 - THUNDER技術(shù)-3D細(xì)胞培養(yǎng)
使用 Rhod、GFP 和 DAPI 濾光片采集的自發(fā)熒光。
使用 DMi8、HC PL APO 63x/1.40 Oil Objective 和 DFC9000 GT 攝像機(jī)采集圖像。
圖像大小為 2048 x 2048 像素,274 個(gè) Z 截面。
圖像由美國(guó)徠卡顯微系統(tǒng)公司的 Louise Bertrand 拍攝。
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