德國徠卡 共聚焦顯微鏡 STELLARIS STED & STELLARIS 8 STED

德國徠卡 共聚焦顯微鏡 STELLARIS STED & STELLARIS 8 STED STED  納米顯微鏡

更快了解真實的世界

我們的 STED 技術(shù)與 STELLARIS 平臺相結(jié)合，為您整合提供超越衍射極限的成像方法。 以令人驚嘆的圖像質(zhì)量和分辨率迅速獲得先進(jìn)的納米顯微成像，同時還保護(hù)您的樣本。德國徠卡 共聚焦顯微鏡 STELLARIS STED & STELLARIS 8 STED STED  納米顯微鏡超高分辨率可以讓您同時觀察多個動態(tài)事件，研究細(xì)胞環(huán)境中的分子關(guān)系和機(jī)制。

STED 和 STELLARIS 無縫集成，您只需點擊幾下即可直接通過共聚焦界面輕松使用 STED。 現(xiàn)在，您可以從樣本中獲得更豐富的信息，因為每一個細(xì)節(jié)都很重要。

STED 和 STELLARIS： 重新設(shè)計超高分辨率

同一臺設(shè)備中的 STED 和 STELLARIS 不僅為您提供出色的共聚焦能力，還可以讓您通過超高分辨率獲得深度樣本信息。

洞察力

得益于我們的二代白激光、優(yōu)化的光路、快速 Power HyD 檢測器和多達(dá)3條STED激光譜線的組合，您可在納米級別上以及整個光譜范圍內(nèi)同時研究多個事件和分子相互作用。

高潛力

TauSTED 是我們新開發(fā)的基于熒光壽命的 STED 方法，可提供圖像質(zhì)量和溫和的活細(xì)胞成像條件，將 STED 超高分辨率成像提升到更高水平。

生產(chǎn)力

通過全新的 ImageCompass 用戶界面可輕松獲得令人驚嘆的共聚焦和 STED 圖像，只需點擊幾次即可設(shè)置好實驗。

共聚焦TauSTED

STELLARIS STED 和 STELLARIS 8 STED

STELLARIS 提供兩種方法將 STED 集成到您的系統(tǒng)中：

STELLARIS STED 是一站式 STED 解決方案

STELLARIS 8 STED 則是我們的可升級系統(tǒng)

兩者在 STED 性能方面都具有相同的優(yōu)勢，因此您可以在決定哪一個符合您的需求時重點考慮 STELLARIS 的額外功能。

STELLARIS 8 STEDSTELLARIS STED

STELLARIS 8 STED

搭載在STELLARIS 8 上的 STED 性能強(qiáng)大，可提供2D和3D納米顯微成像，STED 激光譜線多達(dá)3條

白激光的激發(fā)光波長從440納米到790納米

可選擇 Power HyD S、HyD X 和 HyD R 用于紅光擴(kuò)展應(yīng)用

TauSTED 采用 TauSense 技術(shù)，或者與 FALCON 結(jié)合可進(jìn)行全面的 FLIM 分析

可升級其他功能模塊（FALCON、FCS）

性能強(qiáng)大，可觀察到樣本的更多細(xì)節(jié)、解析樣本中的分子間關(guān)系

為了了解細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)、分化和細(xì)胞 分裂等過程背后的機(jī)制，您需要在細(xì)胞原生環(huán)境中獲得盡可能好的圖像質(zhì)量、靈活設(shè)計實驗以及 快速觀察特定的生物分子。

由于與 STELLARIS 平臺相結(jié)合，STED 受益于我們的二代白激光（WLL）/AOBS技術(shù)、新優(yōu)化的光路、Power HyD 檢測器系列的光譜檢測 以及多條 STED 激光譜線（592、660、775納米）。 STED 提供明亮的圖像，展現(xiàn)出納米級細(xì)節(jié)的結(jié)構(gòu)特征，使您能夠極其靈活地選擇熒光團(tuán)，跟蹤高度動態(tài)的過程。

STED 用于瘧疾研究： 3D STED 775 能夠揭示裂殖體侵入紅細(xì)胞的機(jī)制。 圖像顯示了 RON4（紫色）與蛋白 PfRh5（左側(cè)，綠色）、PfRipr（中間，綠色）、PfCyRPA（右側(cè)，綠色）的疊加。 藍(lán)色是細(xì)胞核，灰色是紅細(xì)胞膜。 比例尺： 1微米。 圖片由澳大利亞沃爾特和伊麗莎·霍爾醫(yī)學(xué)研究所的 Jennifer Volz 和 Alan Cowman 以及德國歐洲分子生物學(xué)實驗室的 Marko Lampe 提供。

增加在納米級別上可同時研究的目標(biāo)數(shù)量

多色熒光標(biāo)記能夠揭示細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)之間的關(guān)系，因為您可以對具有分子特異性的不同組分成像。

STED 和 STELLARIS 特別適合多色應(yīng)用。 您可以在光譜的紅光區(qū)域使用優(yōu)選染料，在綠光區(qū)域選擇熒光蛋白，或在橙光區(qū)域使用新型熒光探針。 您可以進(jìn)行多種熒光共定位研究，以超衍射極限的細(xì)節(jié)進(jìn)行解析。

我們的光譜檢測技術(shù)可提供多達(dá)5個支持 STED 的 Power HyD 探測器，可讓您增加需要在時間和空間上定位的目標(biāo)的數(shù)量。 此外，Power HyD檢測器的數(shù)字化功能、速度以及1.5納秒全系統(tǒng)死區(qū)時間可保證您在信噪比和背景方面獲得出色的圖像質(zhì)量，同時光子收集/像素停留時間比 APD 至少多10倍。

STED 用于發(fā)育生物學(xué)：果蠅胚胎全標(biāo)本制備中 RNA 的 smFISH*。 探針被直接標(biāo)記，沒有信號放大。 上圖： 三色 TauSTED 775 可捕獲 hb CalFluor 610（青色）、gt Quasar 670（綠色）和 eve Quasar 705（紫色）的信號。 下圖：整個果蠅胚胎的共聚焦成像。 樣本由英國曼徹斯特大學(xué) Tom Pettini 提供。*單分子原位雜交

具有出色亮度和分辨率的2D和3D STED 成像

使用 STED 和 STELLARIS，您在2D和3D圖像中都可以獲得所需的結(jié)果，因為分辨率可在x、y和z軸上調(diào)節(jié)。 為確保您在2D和3D中獲得理想的亮度和分辨率，我們?yōu)槟峁﹥?yōu)化的光學(xué)器件，確保整個光譜中激發(fā)光和 STED激光的PSF疊加， 并且不會因自適應(yīng)校正而失去定量分析能力。 我們專門開發(fā)了 STED WHITE 物鏡，確保為各種 STED 實驗提供優(yōu)化條件：

STED WHITE 100x 油鏡專門用于提升分辨率，為日常的固定樣本成像提供出色的性能

STED WHITE 93x 甘油物鏡采用 motCORR 全電動校正環(huán)技術(shù)，深度觀察樣本時可針對溫度變化、折射率失配和不均勻性進(jìn)行自適應(yīng)校正

如前所述，使用 motCORR 的 STED WHITE 86x 水介質(zhì)物鏡也可進(jìn)行自適應(yīng)校正，是溫和的活細(xì)胞應(yīng)用以及 STED-FCS 的理想選擇 (1)。

(1) High photon count rates improve the quality of super-resolution fluorescence fluctuation spectroscopy，作者 F. Schneider 等， J. Phys D: Appl. Phys. 53 164003, 2020。

STED 用于細(xì)胞生物學(xué)： 3D TauSTED 660 可揭示核孔（NPC）在 COS7 細(xì)胞中的分布，實驗用 AF555 標(biāo)記Nup 復(fù)合物 。 一抗 mAb414 可識別核孔籃的幾個核孔蛋白并形成點狀染色。 圖像大?。?12微米，z軸彩色編碼。

TauSTED： 納米顯微成像與熒光壽命

我們專有的 TauSTED 技術(shù)可提供出色的分辨率、圖像質(zhì)量和樣本保護(hù)，大大擴(kuò)展了 STED 實驗的潛力。

TauSTED 利用 STED 所引起的熒光壽命梯度將來自 STED 過程和來自背景的光子進(jìn)行區(qū)分。 因此，您可以顯著減少光劑量，獲得超越傳統(tǒng) STED* 的成像分辨率，實現(xiàn)長時間的延時活細(xì)胞納米顯微成像。

您可以將 TauSTED 用于所有 STED 實驗，特別是多色熒光共定位研究。 您還可以使用 FALCON 分離光譜重疊的 STED 染料。

*分辨率<30納米（橫向）以及<100納米（軸向），取決于樣本和熒光團(tuán)。

共聚焦TauSTED

TauSTED 可在極低的光劑量下提供出色的分辨率

當(dāng)您為 STED 實驗尋找低照明策略時，有一個關(guān)鍵問題： 多低才算低？ 這個問題并不容易回答，因為這取決于您選擇的樣本和熒光團(tuán)。

我們不會隨意做出與您的具體實驗不相關(guān)的光劑量減少承諾。 我們能做的是向您展示 TauSTED 可顯著減少激發(fā)光和 STED 光劑量，使您可以成功地在時間和空間上進(jìn)行測量。 TauSTED 可幫助您消除背景，達(dá)到理想分辨率，避免高補(bǔ)償劑量，避免失去定量分析能力。

這些優(yōu)勢都源自于 STED 與我們 STELLARIS 平臺功能的組合：超快速 Power HyD 檢測器以及 TauSense（STELLARIS STED和STELLARIS 8 FALCON）和 FLIM（STELLARIS 8 FALCON）提供的熒光壽命維度。

STED 用于細(xì)胞生物學(xué)： TauSTED 660 可揭示核孔（NPC）在 COS7 細(xì)胞中的分布，實驗用 AF555 標(biāo)記Nup 復(fù)合物 。 只需2%的 STED 光即可顯示出更多細(xì)節(jié)。 一抗 mAb414 可識別核孔籃的幾個核孔蛋白并形成點狀染色。

使分辨率超越傳統(tǒng)極限

TauSTED 可測量每個 STED 實驗中采集的基于熒光壽命的信息，并實時測定熒光團(tuán)的 STED 響應(yīng)。 無論您使用哪種激發(fā)光和 STED 譜線（592、660、775），這些信息都能讓您提高圖像質(zhì)量（信噪比），利用物理原理消除背景中的光子，使分辨率超越基于強(qiáng)度的STED。

TauSTED 能夠自動完成所有這些功能，使您可以專注于樣本，觀察那些在一般情況下容易丟失的細(xì)節(jié)。

STED 和 DNA 折紙術(shù)成像： TauSTED 775 對標(biāo)稱尺寸為23納米的 GATTA-Bead R 的解析分辨率小于30納米。 比例尺： 1微米。

溫和 STED 超高分辨率用于活細(xì)胞擴(kuò)展成像

較低的激發(fā)光和 STED 光劑量有利于保護(hù)樣本。

這種能力有助實現(xiàn)更長時間的延時實驗，即更多幀數(shù)或更大體積的成像，同時不降低空間分辨率。

STED 用于細(xì)胞生物學(xué)： 溫和活細(xì)胞 TauSTED 592 對穩(wěn)定表達(dá) LifeAct-mNeonGreen 的細(xì)胞成像。 比例尺： 5微米。 這里的延時成像以1幀/秒的速度采集230幀。 樣本由瑞士伯爾尼大學(xué)的 Max Heydasch 提供。

使用 STED-FLIM 分離具有重疊光譜的不同熒光

在 STELLARIS 8 上組合使用 STED 和 FALCON 模態(tài)時，可以用推薦 STED 熒光團(tuán)（遠(yuǎn)紅發(fā)射）進(jìn)行多色超高分辨率解析，因為您可以使用不同種類的熒光壽命將其分離。

這些熒光團(tuán)的發(fā)射光譜嚴(yán)重重疊，無法通過傳統(tǒng)的強(qiáng)度采集方法進(jìn)行區(qū)分。 STED-FLIM 與我們的自動相量分離技術(shù)相結(jié)合，可通過這些熒光團(tuán)的壽命和單個檢測器清楚地將它們分離。

STED-FLIM 用于細(xì)胞生物學(xué)： STED 775 和 FALCON 自動相量分離技術(shù)可以利用不同熒光的壽命來分離具有重疊光譜的熒光種類。 在標(biāo)記了波形蛋白和肌動蛋白的 HEK 細(xì)胞中，單純的光子計數(shù)強(qiáng)度信息（灰色）顯示兩種結(jié)構(gòu)沒有區(qū)別，而 STED-FLIM （綠色，波形蛋白AF647；紫色，Actin ATTO 647N-phalloidin）可以明顯區(qū)分它們。 比例尺： 4微米。 樣本由德國杜塞爾多夫 CAI 的 Sebastian H?nsch 和 Stephanie Weidtkamp-Peters 提供。

易于設(shè)置 STED，提高工作效率

STELLARIS 可以讓新手和專家都能輕松獲得 STED圖像。 現(xiàn)在，您只需點擊幾下鼠標(biāo)即可設(shè)計共聚焦和多色組合實驗以及2D和3D STED。

ImageCompass 專注于樣本特征，能夠智能引導(dǎo)您獲得可信的結(jié)果。

一鍵式光束自動對準(zhǔn)，保護(hù)您的樣本免受過度光照，全自動匹配染料理想的激發(fā)波長，確保優(yōu)化的 STED 性能。

使用 LAS X Navigator 對大面積區(qū)域快速成像，并選擇您感興趣的區(qū)域進(jìn)行 STED 成像。

通過 STELLARIS 功能，例如訪問原始數(shù)據(jù)和快速高效光子計數(shù)，可驗證您的結(jié)果。

STELLARIS 上用于 STED 的 ImageCompass 用戶界面。

在同一個平臺上快速驗證結(jié)果

STED 和 STELLARIS 的組合意味著您可以驗證您的發(fā)現(xiàn)，因為 STED、共聚焦、LIGHTNING 和 TauSense 數(shù)據(jù)都在同一個系統(tǒng)中。

這種組合還意味著您可以訪問您的原始數(shù)據(jù)進(jìn)行定量分析。 TauSTED 技術(shù)可以從熒光壽命信息的物理讀數(shù)中除去背景信息以及調(diào)節(jié)分辨率。

使用 STELLARIS，您始終能夠控制納米顯微成像實驗。